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如何快速高效提取植物蛋白?

蛋白質(zhì)純化是從細(xì)胞、組織或整個(gè)生物體中分離出一種或幾種蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)純化對(duì)于表征目的蛋白質(zhì)功能結(jié)構(gòu)和相互作用至關(guān)重要。蛋白質(zhì)分離與提取是生命科學(xué)研究基礎(chǔ)。由于植物細(xì)胞存在細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu),因此比動(dòng)物細(xì)胞蛋白的提取相對(duì)復(fù)雜。常見的植物蛋白提取方法主要有三氯乙酸-丙酮法和苯酚-丙酮法,兩種方法的基本原理和基本過程大致類似,優(yōu)點(diǎn)是過程簡(jiǎn)單耗時(shí)短,缺點(diǎn)則是存在蛋白得率低和雜質(zhì)較多的問題。

西美杰代理的專業(yè)植物學(xué)品牌Agrisera為廣大植物學(xué)客戶推薦植物蛋白提取緩沖液Protein Extraction Buffer(PEB)——一種通用型提取緩沖液,可以用于提取植物組織(根、葉)和藻類細(xì)胞的總蛋白。與傳統(tǒng)提取方法相比,該緩沖液含有陰離子洗滌劑LDS,在與超聲處理和凍融循環(huán)組合使用時(shí),可以增加溶解的蛋白含量以及未降解蛋白的含量。

  • 產(chǎn)品信息如下:

貨號(hào)

品名

產(chǎn)品說明

AS08 300

1 | PEB (4x) | protein extraction buffer

詳情



 

 

  • 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):


  1. 可以減少蛋白質(zhì)降解和聚集
  2. PEB已經(jīng)在多種高等植物以及苔蘚、地衣、海藻、硅藻、甲藻和藍(lán)藻中進(jìn)行過測(cè)試。
  3.  取回收總蛋白含量高達(dá)5-6μg/μl。



  • 使用量:

對(duì)于高等植物100g新鮮植物組織樣本使用500ul 1XPEB;

對(duì)于藻類樣品,每4-10ug總?cè)~綠素使用200ul 1XPEB

  • 緩沖液組分

4XPEB:40% v/v 甘油;Tris-HCL(PH8.5);LDS;EDTA

  • 注意事項(xiàng)


  1. 將4XPEB原液用無菌去離子水稀釋4倍制備成新鮮的1XPEB使用
  2. 現(xiàn)配現(xiàn)用,以提高提取物中未降解蛋白質(zhì)的產(chǎn)量
  3. 1XPEB的PH 8.25-8.75
  4. 制備新鮮1XPEB時(shí),建議加入蛋白酶抑制劑
  5. 樣品體積維持在2-0.5ml為宜
  6. 適用于少量珍惜樣本的高效蛋白質(zhì)提取



  • 操作流程

點(diǎn)擊鏈接獲?。?/span>AS08 300 (agrisera.com)

  • 已發(fā)表文獻(xiàn):

[1] Altuntas et al. (2020). Proline-stimulated signaling primarily targets the chlorophyll degradation pathway and photosynthesis associated processes to cope with short-term water deficit in maize. Photosynth Res. 2020 Apr;144(1):35-48. doi: 10.1007/s11120-020-00727-w.

[2] Pérez-López et al. (2020). Transcriptome Analysis Identifies Plasmodiophora brassicae Secondary Infection Effector Candidates. J Eukaryot Microbiol. 2020 Jan 11. doi: 10.1111/jeu.12784.

[3] Morin et al. (2019). Morin et al. (2019). Response of the sea-ice diatom Fragilariopsis cylindrus to simulated polar night darkness and return to light. Limnology and Oceanography. 9999, 2019, 1?¢??20. (sea-ice diatom)

[4] Bausch, A.R., Juhl, A.R., Donaher, N.A. et al. Mar Biol (2019) 166: 80.

[5] Matsuo and Atsumi (2018). Xylosylation of proteins by expression of human xylosyltransferase 2 in plants. J Biosci Bioeng. 2018 Sep;126(3):371-378. doi: 10.1016/j.jbiosc.2018.03.013.

[6] Brouwer et al. (2011) TheImpact ofLightIntensity onShade-InducedLeaf Senescence. Plant Cell Environ. Dec. 15 (ahead of print).

[7] Kosawang et al. (2011) Hydrogen yield from a hydrogenase in Frankia R43 at different levels of the carbon source propionate. Journal of Environmental Management, Jan 26

 

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